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제113회 대한화학회 학술발표회, 총회 및 기기전시회 안내 Examination and application of Ni-NTA-coated microplate for a high-throughput O-GlcNAc transferase’s enzymatic activity assay

등록일
2014년 2월 17일 12시 24분 55초
접수번호
1242
발표코드
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발표시간
4월 16일 (수요일) 16:00~19:00
발표형식
포스터
발표분야
생명화학
저자 및
공동저자
김은주
대구대학교 과학교육학부/화학교육과, Korea
O-GlcNAc transferase (OGT) transfers GlcNAc moiety from UDP-GlcNAc to the hydroxyls of serine and threonine residues of numerous cytoplasmic proteins, and is involved in many critical cellular processes. A microplate having a Ni ion captured through a chelation by nitrilotriacetic acid ligand (Ni-NTA) on its surface allows the monitoring of an OGT’s enzymatic activity using an OGT substrate acceptor protein with a poly-histidine tag and its donor substrate, UDP-GlcNAz. Ni-NTA-coated plate is efficiently blocked by a commercially available immunobot blocking buffer. In this study, thorough examinations of Ni-NTA-coated microplate have revealed its properties and led to optimize the solid-based assay method of the OGT’s enzymatic activity.

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