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고감도 Flow Cytometry 를 이용한 DNA 분자의 계수정량

등록일
2008년 2월 22일 13시 15분 17초
접수번호
1469
발표코드
금16B1심 이곳을 클릭하시면 발표코드에 대한 설명을 보실 수 있습니다.
발표시간
금 09시 : 40분
발표형식
심포지엄
발표분야
분석화학 - New Technology for Chemical Analysis
저자 및
공동저자
박상열
한국표준과학연구원 보건측정센터,
DNA는 유전정보 전달물질로서 현대 생명과학의 핵심물질의 하나이다. DNA를 대상으로 한 연구개발이 급속도로 발전하면서 현재 다양한 BT 신상품과 써비스가 개발, 제공되고 있다. 이러한 신상품과 써비스의 안전성과 효과를 담보하기 위해 적절한 QC/QA 기술이 적용되어야 하는데, 그 첫 단계로서 DNA의 정확한 정량분석이 요구된다. 본 연구에서는 극미량 DNA의 정확한 절대 정량분석 기술의 하나로서 용액의 흐름 중에 DNA 단분자들을 하나씩 세서 양을 결정하는 flow cytometry 방식이 시도되었다. 모델 DNA로 45kbp 크기의 lambda DNA를 사용하였고 이를 SybrGold 형광 염료로 염색하여 레이저여기형광검출법으로 검출하였다. 고감도 검출 실현을 위해 Avalanche Photodiode 검출기를 사용하였고, 전기장을 가해 DNA 분자들이 용액흐름의 중심축에 정렬되도록 함으로써 검출광학의 설계가 수월해지도록 하였다. 10-15 M 수준에서 ICP-OES 인 분석에 의한 DNA 정량결과와 일치하는 결과를 얻을 수 있었다.  형광세기 축 상에서 히스토그램 데이터를 얻음으로써 DNA의 크기 분포 정보도 얻을 수 있었는데 이를 활용하여 lambda DNA의 물리적 손상에 관한 유용하고 흥미로운 정보도 얻을 수 있었다.

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